摘要：测定了纳他霉素制剂等7种防霉剂对溜曲霉等川种引起广西仓储烟叶霉变的主要微生物的抑制用途，选出4种平皿抑茵用途较好的防霉剂进行了烟叶防霉试验，结果表明，在烟叶含水量为18％时，纳他霉素制剂2000mg／kg、富马酸二甲酯2000mg／kg和山梨酸钾2000mg／kg能有效抑制霉菌的成长繁殖，预防烟叶发霉。纳他霉素制剂1000mg／kg和富马酸二甲酯1000mg／kR也有较好的防霉成效，烟叶霉变的速度和程度均明显比对照处置要慢、轻。但在烟叶含水量为25％和35％时，高剂量的防霉剂也没办法达到理想的防霉成效。说明可用纳他霉素制剂、富马酸二甲酯和山梨酸钾等高效防霉剂作为烟叶防霉的辅助方法。
烟叶的自然醇化或人工发酵是提升烟叶燃吸品质和可用性的要紧环节之一。近年来，伴随国内烟草产业的飞速进步，烟叶贮藏的规模和数目愈加大，贮藏时间也相应延长。因为烟叶吸湿性强，而烟叶中又含有微生物成长所需要的各种营养物质，如葡萄糖、蛋白质、有机酸、叶绿素、胡萝卜素、烟碱等等，一旦条件适合，烟叶在贮藏过程中极易滋生各种微生物而发生霉变，导致重大经济损失。
现在，国内各省对烟叶仓贮病虫害的研究仅在虫害方面有较多的报道，而霉变生物研究的报道则极少。本研究测定了纳他霉素制剂等7种防霉剂对溜曲霉等10种引起广西仓储烟叶霉变的主要微生物的抑制用途，选出平皿抑菌用途较好的防霉剂进行初步的烟叶防霉试验，以期为烟叶仓贮防霉提供科学的依据。
1、材料与办法
1、供试防霉剂。纳他霉素制剂，甲酸钠，驱霉宝，植物源芳香油。富马酸甲酯，山梨酸钾，双乙酸-钠，苯
2、供试霉变微生物：溜曲霉、匍匐散囊菌原变种、谢瓦散囊菌、米曲霉原变种、菌核曲霉、黑曲霉、孔曲霉、聚多曲霉、A elegans和桔青霉，均为2001-2004年广西烟仓霉变生物类型普查中出现频率较高的霉变微生物。各种霉菌均在PDA斜面上保存，试验前再移入查氏琼脂培养基(CA)或20%蔗糖查氏琼脂培养基(C20A)平板上，25℃培养7d—10d后供测定用。
3、供试烟叶：烤烟片烟。
4、防霉剂对霉变微生物的抑制用途测定。使用菌落成长速率法进行测定。先将防霉剂用灭菌蒸馏水配制成肯定浓度的母液，然后用微量移液器取适量的母液加入溶化后冷却至50℃左右的100mICA或C20A培养基中，混匀后倒皿，即制成含肯定浓度防霉剂的培养基平板，以加入等量的灭菌蒸馏水制成的平板为对照。将预先培养好的霉菌用内径5mm的打孔器沿菌落边缘打取菌块，分别移入各平板的中间，25℃下培养10d后，以十字交又法测量各菌的菌落直径，计算其净成长半径，求出各防霉剂对不同霉菌的抑制率。
5、防霉剂防霉成效试验。试验设防霉剂7个处置：(空白对照)、纳他霉素制剂1000 mg／kg、2000mg／kg，富马酸二甲酯1000mg／kg、2000mg／kg，山梨酸钾2000mg／kg和植物源芳香油2000lLl／kg，设烟叶含水量18％、25％和35％三个处置，共21个处置组合。富马酸二甲酯直接加入片烟中，再将片烟的含水量分别调至18％、25％和35%，其它药剂则放入调节烟叶含水量的水中溶解后再均匀喷洒到片烟上。每处置用片烟1kg，重复3次，塑料薄膜密封，置于25℃下，察看、记录烟叶的霉变状况。
2、结论与讨论
1、本研究经平皿抑菌试验和小量烟叶防霉试验，确定纳他霉素制剂、富马酸二甲酯和山梨酸钾是较理想的烟叶防霉剂。在烟叶含水量为18％时，纳他霉素制剂2000mg／kg、富马酸二甲酯20()Omg／kg和山梨酸钾2000mg／kg均能有效抑制霉菌的成长繁殖，在试验期间经130d未发现烟叶发霉。纳他霉素制剂1000mg／kg和富马酸二甲酯1000mg／kg也有较好的防霉成效，虽然它们处置的烟叶在18d后也开始发霉，但霉变的速度和程度均明显比对照处置要慢、轻。
2、纳他霉素也称游链霉素，是多烯大环酯类，是一种高效防腐剂，它的pH适用范围广，可以有效杀灭及抑制食品中霉菌、酵母菌和其它真菌的成长，抑制真菌毒素的产生。与其他抗菌成分相比，纳他霉素对哺乳动物细胞的毒性极低， 现在已成为30多个国家广泛用台勺一种天然生物性食品防腐剂和抗菌添加剂，国内GB2760—96也规定，纳他霉素可用于食品防腐。富马酸二甲酯是20世纪80年代开发出的一种新型防霉剂，具备高效、低毒、广谱、价廉、化学稳定性好等特征。山梨酸钾则是常见的食品防腐剂。可见，用它们作为贮烟的防霉处置剂应该是很安全的。
3、钟科军等报道在烟叶含水量为18％时，添加800~1200mg／kg的富马酸二甲酯均能达到有效抑制霉菌繁殖的成效，未发现烟叶发霉。但本研究中，在烟叶含水量为18％时，富马酸二甲酯1000mg／kg处置的烟叶在18d后也开始发霉，只不过霉变的速度和程度均明显比对照处置要慢、轻。富马酸二甲酯2000mg／kg则能有效抑制霉菌的成长繁殖，在试验期间经130d未发现烟叶发霉。这与钟科军等的报道有所不同。防效不一样的缘由可能有两个：第一，钟科军等的试验是在室温下进行，而本研究是在25℃的条件下进行，25℃是大部分曲霉成长的最适温度，与室温相比，更利于烟叶发霉；第二，钟科军等的研究地址在湖南常德，与作者研究的区域不同，霉菌的类型可能存在较大差异，因而富马酸二甲酯的防效也有所差异。
4、从防霉成效来看，当烟叶含水量超标不高，或空气相对湿度还不是非常高时，纳他霉素制剂2000mg／kg、富马酸二甲酯2000mg／kg和山梨酸钾2000mg／kg可有效预防烟叶霉变，纳他霉素制剂1000mg／kg和富马酸二甲酯1000mg／kg也有较好的防霉成效；而当烟叶含水量超标过高，或空气相对湿度非常高时，高剂量的防霉剂也没办法达到理想的防霉成效。因此预防烟叶发霉的主要手段仍是预防烟叶回潮，而防霉剂的用则应作为一种辅助方法。
5、植物源农药在农作物病虫害的防治上有着不可估量的前景，是现在国内外研究的热门。广西农业科学院植物保护研究所生物农药组从植物中提炼出的植物源芳香油具备毒性非常低，平皿抑菌谱广的特征，因此作者研究了它对烟叶的防霉用途，试图从植物源农药中找到好的烟叶防霉剂。从研究结果看，植物源芳香油500倍虽然在培养基平板上具备非常不错的抑茵成效，对大部分霉变微生物的抑制率均达100％，但在烟叶霉变防治应用中，却未表现应有些防治成效，其缘由尚待研究。
